Гистолог: специализация, забор материала, методы анализа
Гистологическое исследование: когда оно назначается, как проводится и что показывает
Гистологическое исследование биопсийного материала — один из основных методов лабораторной диагностики новообразований. Это высокоточный способ, позволяющий оценить состояние и структуру клеток, поставить верный диагноз и проконтролировать эффективность терапии.
Что собой представляет гистологическое исследование
Гистологическое исследование — это изучение клеток биоптата (образца пораженной ткани) под микроскопом. Звучит достаточно просто, однако на самом деле метод этот довольно сложный, он предполагает различные технологии обработки биоматериала и различные способы микроскопии.
Биоматериалом для гистологического исследования могут быть образцы различных тканей — кожи, слизистых оболочек, мышц. Иногда гистологическому исследованию подвергается мазок — клетки эпителия, снятые при помощи специальной мягкой щеточки.
Методы проведения анализа
Методы гистологического исследования различаются по способу микроскопии. Выбор обычно определяется целями исследования: нужно ли качественное или количественное определение, выявление химического состава или внешних патологий структур…
Среди применяемых подходов можно выделить следующие методы микроскопии:
- Световая — просвечивание в видимой части спектра.
- Фазово-контрастная , позволяющая изучать клетки без окрашивания. Разновидностью этого метода является темнопольная микроскопия, дающая негативное изображение.
- Интерференционная микроскопия, которая дает возможность определять концентрацию вещества в клетке и проводить количественные морфологические измерения.
- Поляризационная , позволяющая определять характер расположения молекул в клетке.
- Люминесцентная (флуоресцентная) , при которой клетки окрашиваются специальными красителями, заставляющими их светиться во флуоресцентном освещении.
- Ультрафиолетовая — просвечивание в ультрафиолетовой части спектра.
- Электронная , при которой для просвечивания используется не свет, а направленный пучок электронов.
- Радиоавтография — исследование, предполагающее использование изотопных меток, позволяет оценить скорость обменных процессов в клетке.
- Цитоспектрофотометрия — изучение химического состава клетки [1] .
Показания к назначению исследования
Когда показано проведение гистологического исследования? Этот метод диагностики используется во многих областях медицины. Особенно ценен этот метод при изучении новообразований — он позволяет определить их характер (доброкачественный или злокачественный), скорость роста, результативность терапии. Гистологические исследования широко используются в таких разделах медицины, как гастроэнтерология, оториноларингология, гинекология, урология, гематология, пульмонология, нефрология и других. Гистологическое исследование обязательно назначается при подозрении на опухоль, а также для определения стадии процесса. Его проводят перед назначением противоопухолевой терапии и во время лечения для контроля его эффективности (а также при необходимости — его коррекции).
Противопоказаний у метода практически нет — главное, чтобы была возможность взять биоптат. Ограничениями для проведения гистологического исследования могут стать нарушения свертываемости крови и аллергия на анестетики (эти факторы не позволят провести биопсию), тромбоцитопения, риск прерывания беременности, если исследование проводят женщине, ожидающей ребенка, а также некоторые заболевания, в частности, сердечная недостаточность [2] .
Как проводится гистологическое исследование: этапы процедуры
Гистологическое исследование подразделяется на несколько этапов.
Подготовка к исследованию
Зависит от способа и локализации места забора биоптата. Обычно эту процедуру проводят утром. Желательно проводить ее натощак, поскольку нередко биопсия предполагает местный наркоз или седацию. Поэтому последний прием пищи должен состояться за 8 часов до процедуры или раньше.
Взятие материала для гистологического исследования (биопсия)
Забор биоптата может производиться различными способами.
- Во время хирургической операции (так называемая инцизионная биопсия ) врач берет образец пораженной ткани.
- Щипковая биопсия — забор частички материала специальными щипчиками, которые нередко вводятся эндоскопическим методом.
- Пункционная биопсия предполагает забор материала толстой иглой. Часто используется для получения образца клеток из печени и простаты.
- Аспирационная биопсия — образец тканей получают при помощи отсасывания маленькой трубкой, этот способ используют для биопсии миоматозных узлов, узлов щитовидной железы и пр.
- Эксцизионная биопсия — хирургическое удаление пораженных органов и тканей и их последующее исследование.
- Трепан-биопсия применяется для забора жидкостей из костной ткани.
- Кюретаж — соскабливание небольшого количества ткани из полости при помощи специальной ложечки-кюреты с острыми краями.
- Мазок — забор клеток слизистых оболочек тонкой щеткой, похожей на щетку туши для глаз.
Забор биоптата — безопасная процедура, которая проводится под контролем УЗИ, риска повреждения органов нет.
Исследование материала
В современной медицине используются два способа проведения гистологического исследования.
При обычном способе полученный биоптат обрабатывают фиксирующим веществом, которое не дает ему распадаться под воздействием ферментов, и уплотняют, заливая парафином. Затем полученный препарат нарезают микротомом на «ломтики» толщиной не более 8 мкм и окрашивают. После этого препарат изучают при помощи микроскопа и выносят заключение. Обычно результаты готовы через 7–10 дней. Дольше всего приходится ждать результатов обследования биоптата костной ткани — около 2 недель.
Однако иногда результаты гистологического исследования нужны врачу немедленно, в течение часа — например, при проведении операции, когда встает вопрос о немедленном удалении или сохранении органа. В этом случае применяется ускоренная методика гистологического исследования, при которой биоптат замораживают, режут микротомом и сразу проводят микроскопию. Исследование занимает всего час или менее [3] .
Что показывает гистологическое исследование: принципы трактовки результатов
Гистологическое исследование — очень точный метод лабораторной диагностики. Ошибки крайне редки и вызваны в основном нарушением технологии при заборе биоматериала.
Как расшифровать результаты гистологического исследования? Сразу стоит оговориться, что результат, который выдается пациенту на руки, — медицинский документ, и только врач может интерпретировать его. Мы приводим лишь общую информацию об этом документе. Не пытайтесь на ее основании самостоятельно поставить себе диагноз и тем более назначить лечение.
В бланке результатов гистологического исследования всегда указывается имя пациента и его данные, дата и место забора биоматериала, тип исследованных тканей, способ исследования и растворы и препараты, которые применялись во время подготовки образца тканей.
Пациентов нередко тревожит объем заключения гистологического исследования. Обычно в заключении перечисляется огромное количество названий тканей, однако это еще не значит, что исследование обнаружило массу патологий. По правилам заключения специалист описывает вообще все типы тканей, обнаруженных в биоптате, даже если они совершенно здоровы.
Каждый тип тканей оценивается по нескольким параметрам — цвет, консистенция и плотность, наличие изменений, не вписывающихся в норму (таких, как прорастание, размягчение и пр.).
Стоимость исследования
Несмотря на всю сложность, гистологическое исследование стоит относительно недорого. В муниципальных медучреждениях при наличии полиса его делают бесплатно. Однако государственные лаборатории часто перегружены, и пациенту порой приходится долго ждать направления на биопсию и результатов анализа. Поэтому некоторые предпочитают заплатить из собственного кармана, но пройти исследование быстро. В коммерческих лабораториях стоимость гистологического исследования составляет около 3000–4000 рублей. Стоимость биопсии как таковой начинается от 1500–2000 рублей и может доходить до 8000 рублей в зависимости от сложности, способа проведения и типа биоматериала.
Гистологическое исследование требует строжайшего соблюдения технологии забора биоптата, его упаковки и перевозки. Это особенно важно, если транспортировка биоматериала от места забора до лаборатории будет долгой. Поэтому желательно, чтобы забор и исследование материала проходили в одном и том же месте (если есть такая возможность), в лаборатории, оснащенной самым современным оборудованием.
Гистолог
Гистология – это наука, изучающая состав и строение тканей у живых организмов по отношению к их специализированным функциям. Эта дисциплина необходима для понимания и развития биологии, медицины, ветеринарии.
Гистопатология – это диагностика и исследование биологических тканей с целью наблюдения за появлением пораженных клеток и патологии в тканях очень детально под микроскопом.
Кто такой гистолог
Соответственно гистолог или же гистопатолог – это врач, который исследует структуру тканей в живом организме, диагностирует и изучает болезнь, используя интерпретацию клеток и образцов тканей органов человека.
Именно его работа является неотъемлемой частью борьбы с раковыми заболеваниями, посредством постановки правильного диагноза и классификации опухоли.
Именно он изучает материалы, взятые при различных операциях, соскоба при осмотре у гинеколога, небольшое количество ткани или жидкости, взятые при биопсии опухолевых заболеваний. Также может исследовать клетки мокроты и различной жидкости с плевры, выпота или же абдоминальной жидкости.
Гистопатологи несут ответственность за постановку диагнозов после исследований тканей и этим очень помогают клиницистам в лечении пациентов. Ведь они тесно сотрудничают с другими клиническими специальностями, такими как гинеколог, онколог, хирург, невропатолог и многими другими.
Какими навыками должен обладать
Врачи данной специальности должны быть внимательными к деталям для исследования тканей и диагностики болезней. Ведь многие из них выглядят очень похожими, поэтому важно выявлять небольшие, но различия. Они должны уметь работать четко и быстро, часто принимая критические решения каждый день, поскольку интерпретация того, что они видят под микроскопом, определит, какое лечение пациент должен получить.
Гистопатологи должны обладать высокой степенью мотивации и уметь работать как самостоятельно, так и в составе команды. Хорошие коммуникативные навыки необходимы для обсуждения актуальности микроскопических данных с коллегами-клиницистами. Очень важны хорошие диагностические навыки, чтобы определить не только тип заболевания, но также его тяжесть и степень, что необходимо при выборе лечения.
Для чего проводить гистологическое исследование
Метод гистологической диагностики активно используется для определения причин бесплодия, болезней эндокринных желез, воспалений внутренних органов, предопухолевых заболеваний. Еще проводят чтобы выявить ранние стадии развития рака при гастритах, язвах, установить степень поражения печени.
Диагностику биоптатов органов человека проводят для того, чтобы определить изменения строения и структуры тканей и клеток при различных патологиях.
- определять объемы и радикальность хирургического вмешательства;
- изучать оценку качества проводимого лечения или скорость развития данного заболевания;
- определять характер, форму, степень или стадию патологического процесса (воспалительного, опухолевого: злокачественного или же доброкачественного);
- ранее выявить заболевание, до появления жалоб пациента.
Данное исследование чаще всего используют для диагностики онкологического заболевания. Ведь без него, врачи-онкологи не смогут провести правильное лечение. Гистологи обрабатывают клетки и ткани, удаленные из подозрительных «глыб и шишек», идентифицируют характер патологического процесса. Если они злокачественные, то предоставляют врачу-клиницисту информацию о типе рака, его стадии и для некоторых опухолей их ответ на определенные методы лечения.
На данный момент широко используется в европейских странах новые методики, такие как флуоресцентная гибридизация in situ и полимеразная цепная реакция (ПЦР), чтобы отображать генетический материал в тканях опухолей, которые необходимы для лечения многих видов рака.
Виды образцов для детального изучения
В лабораторию для диагностики поступают материалы, которые берут при проколе тонкой иглой определенного органа или новообразования для исследования, так же называемой пункционной биопсией.
Это жидкие или очень мелкие кусочки ткани, чаще отдельные клетки, а не группы клеток, например, опухолевое образование лимфатического узла.
Поскольку врач может взять только маленькую его часть, есть большая вероятность, что участок с патологическим очагом не попадет на взятый участок. Тогда нужно будет проводить повторную пункционную биопсию.
Примерами исследований при биопсии могут быть эндоскопия (например, осмотр пищевода и желудка) или кольпоскопия (осмотр шейки матки с помощью увеличительного инструмента). Примером более организованной процедуры является биопсия почек, когда кусочек ткани получают путем пропускания иглы через кожу и в почку.
Обычно мало информации можно получить, глядя на этот биоптат невооруженным глазом, и ключевую информацию получают только под микроскопом. Многие биопсии обнадеживают, поскольку проводились для того, чтобы исключить рак. И она не подтверждает рак, но может, например, показать воспаление, которое объясняет клинические симптомы и признаки у больного. Другие биопсии могут показать атипичные клетки и уже гистолог ищет признаки, по которым определяется какой рак присутствует, насколько процесс запущен и будет ли он реагировать на определенные виды лечения.
Также может проводится срочное исследование, когда материал получают в момент проведения операции, чтобы знать, как действовать далее для успешного проведения лечения. Это нужно делать не больше, чем за 20 минут.
Хирург удаляет небольшое количество ткани и ждет, пока гистолог сделает выводы и поставит диагноз, прежде чем решить, как действовать далее.
Пациент спит под наркозом, пока это происходит, и ничего не знает об этом. Достаточно часто врачи-гистологи приносят хорошие новости, например, обнаруживая, что часть исследуемого органа является полностью доброкачественной и не о чем беспокоиться.
Подготовка биопсийного материала
Наверное многие больные и даже врачи задавали себе вопрос: «Интересно, а что происходит с моей биопсией прямо сейчас?». Ниже описан процесс, через который проходят практически все образцы.
Шаг первый – фиксация ткани. Подготовка слайдов начинается с фиксации вашего образца. Это важно в подготовке тканей, и целью этого является предотвращение тканевого автолиза и гниения. Для достижения наилучших результатов биологические образцы тканей следует сразу фиксировать после сбора. Лучше всего это происходит в 10% нейтральном буферном формалине.
Оптимальное объемное отношение формалина к образцу должно составлять не менее 10: 1 (например, 10 мл формалина на 1 см3 ткани).
Это позволит большинству тканей стать адекватно фиксированными в течение 24-48 часов. Контейнеры с формалином должны быть герметично закрыты и правильно маркированы.
Шаг второй – перенос материала на кассеты. После фиксации образцы обрезаются с помощью скальпеля, чтобы они могли вписаться в соответствующую маркированную тканевую кассету. Они не должны быть настолько большими, чтобы заполнять целую кассету – их обрезают, чтобы они не касались краев. Кроме того, исследуемые материалы не должны быть слишком толстыми (в идеале они должны быть меньше 4 мм), иначе рискуют стать «вафлей», когда крышка кассеты закроется. Заполненные тканевые кассеты затем хранят в формалине до начала обработки.
Шаг три – обработка тканей. Она может длиться от четырех часов до тринадцати часов в зависимости от их размера. Обработка тканей уже в тонких микроскопических срезах обычно осуществляется с использованием специального блока следующим образом. Спирт медленно обезвоживает ткань, удаляя из нее воду и формалин. Ксилол, органический растворитель, удаляет спирт из ткани. Парафиновый воск заменяет ксилол и постоянно проникает в ткань. Затем пластиковые кассеты, содержащие кусочки ткани, переносятся. Ткань удаляют из кассеты и помещают в форму, которая затем заполняется жидким парафином. Затем часть кассеты, на которой печатается больничный номер пациента, помещается поверх формы. После охлаждения верхняя часть кассеты и вложенные в парафин ткани становятся одной единицей, известной как парафиновый блок.
Четвертый шаг – разделение тонких участков биопсийной ткани на стеклянные слайды. Парафиновый блок затем переносят в инструмент, известный как микротом. Блок помещается в держатель, который затем проходит через лезвие. Каждый раз, когда блок проходит лезвие, он продвигается вперед на три или четыре микрометра. Это примерно толщина одной клетки ткани.
Когда ткань продолжает проходить через лезвие, несколько участков ее воспроизводятся в длинной ленте. Эта лента подбирается лаборантом и плавает в ванне с теплой водой. Когда все неровности сглаживаются, гистолог забирает их из воды. Слайд с очень тонким участком парафина и ткани является результатом микротомии.
Пятый шаг – окрашивание. Большинство клеток прозрачны и кажутся почти бесцветными, когда они не окрашены. Используют два окрашивающих реагента – это гематоксилин и эозин. Гематоксилин окрашивает ядро клеток ткани от темно-синего до черного цвета. А эозин окрашивает внутреннюю часть клетки, окружающую ядро, в светло-розовый цвет, а ткань вне клетки от темно-розового цвета до красного. Это делает ткани более заметными и более легкими для оценки клеточного состава.
Можно сделать выводы, что врач-гистолог подтверждает или опровергает различные заболевания в организме человека, которые были поставлены другими врачами-клиницистами. Без его окончательного диагноза врачи не могут назначить правильное и эффективное лечение. Именно поэтому работа гистолога является очень важной и ответственной для медицины на сегодня.
Тема 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В ГИСТОЛОГИИ. ПРИГОТОВЛЕНИЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА
Тема 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В ГИСТОЛОГИИ. ПРИГОТОВЛЕНИЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА
Основным методом исследования в гистологии является микроскопирование – изучение гистологических препаратов под микроскопом. В последнее время микроскопия сочетается с другими методами – гистохимией и гисторадиографией. Для микроскопии используют различные конструкции микроскопов, позволяющие изучать различные параметры гистологических препаратов.
Выделяются следующие виды микроскопии:
1) световая микроскопия (наиболее распространенный вид микроскопии, при этом разрешающая способность микроскопа составляет 0,2 мкм);
2) ультрафиолетовая микроскопия (разрешающая способность микроскопа составляет 0,1 мкм);
3) люминисцентная микроскопия (применяется для определения в исследуемом гистологическом препарате определенных химических структур);
4) фазово-контрастная микроскопия (применяется для обнаружения и изучения определенных структур в неокрашенных гистологических препаратах);
5) поляризационная микроскопия (используется в основном для изучения волокнистых структур);
6) микроскопия в темном поле применяется для изучения живых объектов;
7) микроскопия в падающем свете (предназначена для изучения толстых объектов);
8) электронная микроскопия (наиболее современный вид микроскопии, имеющий разрешающую способность 0,1 – 0,7 нм). Имеются две разновидности электронной микроскопии – просвечивающая (трансмиссионная) и сканирующая (или растворная) микроскопия, дающая отображение поверхностных ультраструктур.
Гистологические и цитохимические методы применяются для определения состава химических веществ и их количества в определенных структурах. Принцип метода заключается в химической реакции между реактивом и субстратом, содержащимся в исследуемом веществе. При этом образующиеся побочные продукты реакции можно обнаружить с помощью световой или люминисцентной микроскопии.
Метод гистоавторадиографии позволяет выявить состав химических веществ в исследуемых структурах и интенсивность обмена по включению радиоактивных изотопов. Данный метод чаще всего используется при экспериментах на животных.
Метод интерферонометрии позволяет определять сухую массу вещества в живых или фиксированных объектах.
Метод культуры клеток – это выращивание клеток в пробирках или в особых капсулах в организме и последующее изучение живых клеток под микроскопом.
Метод витального окрашивания – введение животным в кровь или в брюшную полость красителя (трепанового синего), который при жизни животного захватывается определенными клетками – макрофагами, а после забоя животного и приготовления препарата определяются и подсчитываются клетки, содержащие краситель.
Иммуноморфологические методы позволяют с помощью предварительно проведенных иммунных реакций (на основе взаимодействия антиген – антитело) определять субпопуляцию лимфоцитов, степень чужеродности клеток, проводить гистологическое типирование тканей и органов, т. е. определять их гистосовместимость для дальнейшей трасплантации.
Метод дифференциального центрифугирования – изучение отдельных органелл или даже их фрагментов, выделенных из клетки. Для этого кусочек исследуемого органа растирают, заливают физиологическим раствором, а затем разгоняют в центрифуге при различных оборотах (от 2 до 150 тыс. в 1 мин). В результате центрифугирования получают интересующие фракции, которые затем изучают различными методами.
Методы морфометрии – количественные методы. Они позволяют определять размеры и объемы ядра – кариометрия, клеток – цитометрия, органелл – электронная морфометрия, а также определять число клеток различных популяций и субпопуляций. Данные методы широко используются в научных исследованиях.
Различные экспериментальные методы – пищевая и водная нагрузка, физические методы (УВЧ, СВЧ, лазеры, магниты). Они применяются для изучения реакции интересующих структур на то или иное воздействие и сочетаются с методами морфометрии, цито– и гистохимии. Данные методы также применяются в научных исследованиях.
Таким образом, основным и наиболее распространенным методом изучения в гистологии является микроскопия. Приготовление гистологического препарата включает в себя следующие этапы.
1. Взятие материала – кусочка ткани или органа. При заборе материала необходимо выполнять следующие правила:
1) забор материала должен проводиться как можно раньше после смерти или забоя животного, при возможности от живого объекта, чтобы как можно лучше сохранить структуру исследуемых клеток;
2) забор материала должен проводиться острым инструментом, чтобы не травмировать ткани;
3) толщина кусочка не должна превышать 5 мм, чтобы фиксирующий раствор смог проникнуть на всю глубину ткани;
4) обязательно необходимо произвести маркировку кусочка, при этом указываются наименование органа, номер животного или фамилия человека, дата забора.
2. Фиксация материала. Данный этап проводится для того, чтобы остановить обменные процессы в клетке и сохранить ее от распада. Для этого взятый на исследование кусочек ткани погружают в фиксирующий раствор. Раствор может быть простым (спирт или формалин) и сложным (раствор Карнуа, фиксатор Цинкера). Фиксатор вызывает денатурацию белков и сохраняет структуру клеток в состоянии, близком к прижизненному. Фиксацию можно проводить также путем замораживания – охлаждением жидким азотом или струей углекислого газа.
3. Заливка кусочков ткани в уплотняющие среды (парафин, смолы) – или замораживание. Данный этап необходим для того, чтобы в последующем из исследуемой ткани можно было изготовить тонкий срез.
4. Приготовление срезов на микротоме или ультрамикротоме с помощью специальных ножей. После этого срезы для световой микроскопии приклеиваются на предметные стекла, а для электронной – монтируются на специальные сеточки.
5. Окраска срезов или их контрастирование (для электронной микроскопии). Перед окраской срезов необходимо удалить уплотняющую среду – выполнить депарафирование. С помощью окраски достигается контрастность изучаемых структур. Красители можно подразделить на основные, кислые и нейтральные. Наиболее широко применяются основные красители (гематоксилин) и кислые (эозин). Часто используются и сложные красители.
6. Просветление срезов в ксилоле и толуоле. Их заключают в смолы (бальзам и полистирол) и закрывают покровным стеклом.
После данных процедур препарат можно исследовать под световым микроскопом. Помещенные под стекло срезы для светового микроскопа могут долго храниться и многократно использоваться. Для электронной микроскопии каждый срез используется только 1 раз, при этом он фотографируется, и изучение структур ткани производится по электронограмме.
Если ткань имеет жидкую консистенцию (например, кровь, костный мозг), то препарат изготавливают в виде мазка на предметном стекле, который затем также фиксируется, окрашивается и изучается.
Из ломких паренхиматозных органов изготавливают препараты в виде отпечатка органа, проводят разлом данного органа, затем к месту разлома прикладывают предметное стекло, на которое приклеиваются свободные клетки. После этого препарат фиксируется и изучается.
Из некоторых органов (например, брыжейки, мягкой мозговой оболочки) или из рыхлой волокнистой соединительной ткани изготавливают пленочные препараты путем растягивания или раздавления между двумя стеклами с последующей фиксацией и заливкой в смолы.
Данный текст является ознакомительным фрагментом.
Гистологическое исследование биопсийного материала
Гистологическое исследование биопсийного материала проводят после различных эндоскопических процедур и операций со взятием образца на анализ. Его задача состоит не только в обнаружении раковых клеток, но и любых патологических изменений в тканях. Гистологическое исследование помогает установить точный диагноз и назначить эффективное лечение.
Для чего назначается
Гистологическое исследование – это микроскопическое изучение биоматериала, взятого в патологическом очаге больного. Это самый точный метод для обнаружения опасных клеток, он является обязательной процедурой в обследовании пациента с подозрением на онкологию. Ценность его результатов несравнима с ультразвуковым исследованием или рентгеном.
- установление, подтверждение, уточнение или опровержение серьезных диагнозов;
- обнаружение онкологии на ранней стадии;
- подтверждение или опровержение злокачественности новообразований;
- установление стадии и динамики опухолевого процесса;
- обнаружение наиболее действенных лекарств для дальнейшего лечения;
- проверка эффективности терапии по анализу изменений в тканях;
- диагностика состояния органов при тяжелых патологиях, например, циррозе печени;
- получение данных для плановой операции и т. д.
Для получения подробной консультации необходимо записаться на прием к узкому специалисту в медицинский центр. Врач определит целесообразность биопсии и вид вмешательства.
Цена исследования напрямую зависит от сложности процедуры.
Подобные процедуры планируются заранее (кроме срочной биопсии во время операции). Манипуляции по взятию биоматериала для исследования требуют подготовки пациента.
Биопсия проводится с применением анестезии, поэтому перед процедурой нельзя есть и пить. Необходимо сделать анализ крови на наличие ряда инфекций. Пациенту даются рекомендации по поводу исключения определенных препаратов за несколько дней до исследования.
Клиники используют несколько способов взятия биопсийного материала на гистологическое исследование.
Методика забора биоптата
Взятие материала толстой полой иглой путем пункции патологического очага. В результате манипуляции получают столбики тканей.
Отсечение части органа или опухоли в ходе хирургической операции.
Отсасывание содержимого вакуумом из патологических образований, например, миомы матки или узлов в щитовидке.
Иссечение целого органа или новообразования с последующим вырезанием из него фрагментов для анализа.
Взятие образца специальными биопсийными щипцами при бронхоскопии, колоноскопии, ФГДС и т. д.
Процедура соскабливания со стенок естественных и патологических полостей, например, матки. Полученный материал отправляется в лабораторию.
Используется чаще всего в гинекологии. Подразумевает взятие мазка со слизистой.
В медицине существуют и другие методы забора биоматериала для гистологии.
Техника проведения процедуры
Лаборатории используют два метода реализации гистологического исследования:
Первый используется в плановом порядке, второй – во время хирургических вмешательств.
Традиционный способ
Этот метод применяется при плановой биопсии, срок получения результатов – 5-7 (иногда 10-14) дней. Образцы тканей окрашиваются специальными составами, что позволяет различить элементы клеток или ткани. Ядра окрашивают одним цветом, а для цитоплазмы используют контрастный краситель.
Далее образцы заливаются расплавленным парафином и нарезаются на микрослои толщиной 1-8 микрон. Полученные пластины наносят на предметное стекло, подсушивают и изучают под микроскопом. Одно из главных преимуществ традиционного метода в том, что образцы на стекле хранятся неограниченное время и пациент может их получить на руки. При желании можно перепроверить диагноз.
Срочный способ
Ускоренный метод позволяет исследовать образцы в течение 1 часа. Такой способ ценен, когда хирург должен принять незамедлительное решение об удалении или сохранении органа оперируемого больного. Биоматериал не обрабатывается парафином. Его замораживают, послойно насекают, помещают на предметное стекло и окрашивают. Затем образцы изучают под микроскопом.
Правила забора материала
Достоверность результатов гистологического исследования во многом зависит от соблюдения правил забора биоптата.
- Биопсийные процедуры проводят острым инструментом во избежание деформации материала.
- Биоптат из патологического образования берется из центра и на границе со здоровыми тканями.
- Рекомендации к иссеченному образцу: небольшой размер, плоская форма, толщина 3-5 мм. Эти условия необходимы для равномерной фиксации биоптата.
- После забора материала его немедленно помещают в емкость с нейтральным формалином (10%). Соотношение объема биоматериала и фиксатора должно быть 1:10.
- Запрещается помещать несколько биопсийных образцов в одну посуду.
- Емкость с формалином плотно закрывают во избежание испарения содержимого и высыхания биоптата.
- Строго запрещено разделение биоматериала на части для отправки в несколько лабораторий. Патологические изменения могут быть обнаружены только в одной из частей исследуемой ткани. Это может привести к получению противоречивых результатов.
- Образец маркируют (ФИО больного, откуда взяты ткани, дата) и отправляют в патогистологическую лабораторию.
Расшифровка результатов
Врач-патоморфолог составляет заключение с подробным описанием обнаруженных морфологических изменений в тканях и выносит предварительный диагноз.
Пациенту на руки выдается бланк-заключение с развернутым описанием результатов патоморфологического исследования. Не рекомендуется самостоятельно интерпретировать полученные данные. Расшифровка результатов гистологии, постановка окончательного диагноза и назначение лечения исключительно в компетенции квалифицированного врача.
Результаты подобных исследований практически не содержат погрешностей и дают исчерпывающую информацию для постановки диагноза. За исключением случаев, когда собран недостаточный объем биоматериала или изменения в тканях незначительны. Также ошибки возможны при неправильном заборе и хранении биоптата.
6 отраслей медицины, в которых активно используется гистологическое исследование
Что же такое гистологическое исследование? Это специальный метод диагностики, при котором объектом исследования является орган (ткань органа, маленький кусочек), который изучается (исследуется) под микроскопом. Такая диагностическая процедура позволяет выявить изменения на клеточном уровне, ещё до появления изменений органа, заметных невооружённым глазом!
Значение гистологического исследования для современной медицины
Нельзя преуменьшить роль гистологии в современной медицине. Особенно в диагностике злокачественных новообразований (рак), ведь правильно установленный диагноз (правильно установленный вид опухоли) — это уже 50% успеха в лечении.
Гистологические исследования применяются практически всеми врачами различных специальностей (гинекологи, онкологи, патологоанатомы, гастроэнтерологи, хирурги, урологи и т.д.).
Суть гистологического исследования
Анализ на гистологию назначить может любой доктор, к которому Вы попали на приём. Для чего назначается такой анализ? Конечно же, анализ на гистологию назначается не всем и не во всех случаях, для этого должны быть определённые показания.
Если, например, исследования (рентгенограмма, УЗИ, КТ, МРТ и т.д.) не дают точного ответа на поставленные врачом вопросы и невозможно поставить точный диагноз. А без точного диагноза навряд ли получится качественное лечение Вашего заболевания.
С какой целью выполняется гистологическое исследование?
Техника выполнения
Любой гистологический препарат изучается под микроскопом световым или электронным, это зависит от оснащённости лаборатории. Но в основном, конечно, изучается препарат (биоптат) под световым микроскопом.
Изучает и даёт заключение врач-гистолог или патологоанатом (патологоанатом — это не только работник морга, врачи этой специальности обязательно владеют техникой микроскопического исследования препарата!). Подготавливают препараты к исследованию лаборанты.
Чтобы гистологически исследовать ткань, нужны особые приготовления.
- Самое первое, что происходит – это забор материала (биоптата), изначально кусочек органа должен быть помещён в специальный раствор (формалина или спирта), это делается для фиксации ткани и для предотвращения различных гнилостных процессов.
- Затем биоптат заливают парафином (получатся плотный квадратик).
- Следующее – на специальном аппарате делают тонкие срезы, чтобы слои клеток не накладывались друг на друга, это улучшает качество препарата.
- Окрашивание препаратов. Для того чтобы изучить различные структуры или изменённые клетки, используются специальные красители.
- Ну и, в конце концов, для того чтобы препарат сохранялся дольше, происходит его дальнейшая специальная обработка.
Интерпретация результатов гистологического исследования
Врач–гистолог получает материал и начинает он с описания макроскопической картины. То есть в начале он описывает внешний вид (цвет, плотность, видимые изменения поступившего к нему органа или кусочка ткани). Затем препарат готовится (информация об этом представлена выше) и изучается уже непосредственно под микроскопом. Изучается микроскопическая картина, которой врач-гистолог даёт описание и в конце ставит диагноз.
В направлении на гистологию лечащим врачом часто указывается предварительный диагноз или диагноз под вопросом, который, собственно, может подтвердиться или нет.
Бывают ли ошибки в результатах гистологии?
К сожалению, ошибки, бывают везде! Поэтому исследование иногда проводится несколько раз. Дело не всегда в недобросовестном отношении врача, бывают ситуации, когда забор материала изначально сделан неправильно. Поэтому биоматериал следует брать точно из изменённой ткани (участков органа).
Также и в лаборатории неправильная подготовка материала для исследования, плохое оснащение и истёкший срок годности реактивов могут повлиять на результат.
Поэтому все этапы от забора материала и до изучения врачом-гистологом должны соблюдаться с особой точность и аккуратностью.
В каких отраслях медицины гистология имеет большое значение
Гистологические исследования назначаются практически всеми врачами. Но наиболее распространён этот метод в онкологии. В онкологических диспансерах имеется специальное отделение патологической анатомии, куда и отправляются материалы, где выставляется точный диагноз.
Гинекология
В гинекологии используют такие методы забора материала, как мазки, кюретаж (выскабливание), исследование целого или части органа. Большой процент заболеваний женской половой системы подразумевает сам собой направление некоторых материалов на гистологию.
При подозрении на какие заболевания могут отправить материал на гистологию? Это:
- рак матки (шейки или тела);
- рак яичников;
- рак молочных желёз;
- дисплазия матки;
- эрозии;
- аборт и т.д.
Это далеко не все заболевания, а лишь малое их количество. В последнее время рост заболеваний среди женщин (именно женская патология) увеличивается, особенно онкологических.
Гастроэнтерология
В гастроэнтерологии чаще всего взятие исследуемого материала происходит при эндоскопическом исследовании (ФГДС), то есть можно оценить и внешний вид изменённого участка и плюс ко всему взять биоптат. Таким образом определяется гастрит, язвы, опухоли, в биоптате также можно определить возбудителя язвенной болезни – бактерию хеликобактер пилори (гистохимическое исследование).
Следует помнить о том, что язвенная болезнь и эрозивные гастриты — это предраковые состояния, поэтому таким пациентам следует хотя бы раз в год проходить обследование (эндоскопическое) своего желудочно–кишечного тракта.
Онкология
Повторюсь ещё раз — это самая обширная группа заболеваний (онкологические заболевания), которая требуют именно этого метода исследования. Диагноз, который подтверждён гистологически, называется верифицированный диагноз.
Почему именно при онкологических заболеваниях обязательно отправляют материал для исследования? Существует великое множество различных видов опухолей, которые могут быть похожи друг на друга макроскопически, но при детальном микроскопическом исследовании различаться. Лечение той или иной опухоли зависит от её строения и вида ткани, из которой она происходит, поэтому точное определение диагноза очень важно в этом случае.
Другие области исследования
Гистологические исследования широко используются в эндокринологии (исследования щитовидной железы), особенно при аутоиммунных её поражениях, когда анализы гормонов не дают полную и точную картину.
Исследование предстательной железы также широко распространено, это связано с частыми заболеваниями у мужчин после 40 лет.
Гистологический анализ также важен в гематологии, он используется как для определения опухолевых процессов (лейкозы хронические и острые), так и для установления характера анемии (например В12-дефицитная анемия, используется пункция костного мозга).
Перечислять можно бесконечно. Проще говоря, любой орган и ткань могут быть подвержены гистологическому анализу. Так как каждая ткань имеет определённое строение и определённые клетки в своём составе, при наличии изменений черты строения меняются и уже можно заподозрить патологию.
Расценки на гистологическое исследование
В коммерческих лабораториях цены примерно одинаковые, в общий чек входит забор материала (биоптата) плюс само исследование. В общем, цена варьирует в общей сложности от 1500 рублей до 25 000 – 30000 рублей. Результаты анализов можно получить в течение 5 – 7 дней.
Заключение
Гистологическое исследование, а именно забор биопсийного материала проводится чаще всего под контролем УЗИ, поэтому не стоит бояться идти на такую процедуру.
Важно понять, что такое исследование в некоторых случаях является необходимостью! Помните, что залог успеха в лечении – правильно поставленный диагноз, для постановки которого как раз и используется гистологическое исследование.
Литература
- Гистология, цитология, эмбриология, Афанасьев, 2002 г, 744 с.
- В. В. Давыдов, М. М. Лапкин, В. О. Самойлов, В. А. Черешнев, МОРФОЛОГИЯ ТКАНЕЙ.
- А. Г. Гунин, Электронный атлас микрофотографий по гистологии.
- Ю. В. Каминский, В. С. Тимошенко, О. Г. Полушин УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ по патологической анатомии и биопсийно-секционному курсу.
Мы приложили много усилий, чтобы Вы смогли прочитать эту статью, и будем рады Вашему отзыву в виде оценки. Автору будет приятно видеть, что Вам был интересен этот материал. Спасибо!