Анализ пцр на гепатит с: как проводится, что показывает

Анализ ПЦР на гепатит С

Гепатит С – серьезная болезнь, которая разрушает печень. Она может привести к циррозу печени. Между началом заболевания и тем моментом, когда начнут вырабатываться антитела, может пройти до полугода, поэтому диагностировать заболевание с помощью иммуноферментного анализа невозможно. Своевременно определить болезнь и начать лечение поможет анализ ПЦР на гепатит С.

Показания к исследованию

Когда нужно сдать анализ:

• если иммуноферментный анализ дал положительный результат;
• у пациента наблюдаются симптомы цирроза или поражения печени: она меняется в размере, селезёнка становится больше, в области живота видны расширенные вены, кожа желтеет, наблюдаются боли в правой части живота;
• активность АЛТ и АСТ в анализе крови повышена;
• перед тем, как начать лечение, для того, чтобы определить количество вируса в крови инфицированного;
• чтобы следить, насколько эффективной оказалась терапия. После лечения – чтобы контролировать состояние здоровья и избежать рецидива;
• если диагностирован гепатит В, чтобы исключить смешанное поражение печени;
• после полового акта с человеком, зараженного гепатитом.

Цели обследования

Цель ПЦР (или полимеразной цепной реакции) – изучить состав крови и обнаружить флавивирус (гепатит С). Существенный плюс этого анализа в том, что он распознаёт вирус на той стадии, когда он ещё не начал процесс необратимых реакций. ПЦР позволяет увидеть, насколько сильно поражён организм, показывает качественные характеристики и определяет генотип вируса. Всё это позволяет назначить максимально подходящее лечение для каждого конкретного случая.

Разновидности анализов

ПЦР на выявление гепатита С подразумевает несколько исследований:

• качественного анализа;
• количественного анализа;
• генотипирования.

Качественный анализ

ПЦР ещё называют качественным анализом. Если он показывает отрицательный результат, значит, распознать вирус в организме нельзя, так как его содержание меньше, чем оборудование может уловить. В такой ситуации нужно определиться, насколько реагент чувствителен, чтобы скорректировать дальнейшее решение.

Анализ может показать положительный результат уже приблизительно через пять дней после того, как человек заразился.

Количественный анализ

Этот вид исследования анализа демонстрирует уровень вирусной нагрузки, т. е. концентрацию флавивируса в теле – сколько фрагментов вируса приходится на 1 кубический см крови пациента.

Этот вид анализа ПЦР назначается больному перед тем, как начать противовирусную терапию, или после трёх месяцев лечения, чтобы посмотреть, насколько эффективен назначенный курс.

Этот вид анализа показывает:

• насколько велика опасность заразить другого человека, эта вероятность прямо пропорциональна показаниям вирусной нагрузки;
• какое лечение подойдёт в этом случае, и насколько оно будет плодотворным;
• длительность лечения – чем выше концентрация вирусов, тем дольше будет терапия.

Пациенту стоит знать, что тяжесть заболевания может не зависеть от уровня вирусной нагрузки. Иногда даже при высокой концентрации вирусов в крови пациента, печень оказывается поврежденной лишь в незначительной степени. Однако если у беременной женщины высокий уровень вирусной нагрузки, то велика вероятность передать заболевание своему ребёнку.

Считается, что нижняя норма концентрации РНК-вируса – до 600.000 МЕ/мл, среднее – от 600.000 до 700.000, высокое – от 800.000 и выше.

Генотипирование

Из-за того, что этот вирус подвержен высокой мутации, в ходе исследования очень важно определить, какой конкретно генотип находится в крови человека. Всего существуют 11 генотипов гепатита С и множество их подвидов. Но на территории России распространены всего три: 1, 2 и 3.

Генотипирование даёт возможность определить, насколько устойчивым оказался вирус. От этого зависит метод лечения.

Все генотипы гепатита С по-разному реагируют на лечение. 1 генотип лечится минимум год, а шанс выздороветь – около 60%. Генотипы 2 и 3 лечатся по полгода, а вероятность избавиться от недуга – около 85%.

Кроме того, генотипирование даёт возможность посмотреть, в каком состоянии находится печень больного. Например, накапливание в печени жира указывает на то, что пациент страдает от 3 генотипа вируса.

Анализ крови на данной стадии показывает цифру, которая характеризует генотип. Изредка случается, что определить генотип не получается, и в ответах из лаборатории указано «не типируется». Это означает, что человек страдает от генотипа, нераспространенного в этой географической зоне. Чтобы обнаружить его, придётся сдать анализ еще раз, но с той системой диагностики, которая сможет его распознать.

Процесс расшифровки результатов

В анализах ПЦР на гепатит С, полученных из лаборатории, обычно указывают определённые данные, и расшифровать их можно даже самостоятельно:

• обнаружено/не обнаружено (качественный анализ);
• количество вирусов (количественный анализ);
• цифра генотипа;
• название теста.

Считается, что наибольшее внимание следует уделить второму пункту, так как исходя из этих показателей, можно сделать прогноз, определить продолжительность лечения и его тип.

Несмотря на понятность анализа, нельзя самостоятельно ставить себе диагноз и заниматься самолечением, результаты анализа нужно показать лечащему врачу.

Как подготовиться к сдаче анализа

Для того чтобы получить достоверный результат, важно соблюсти ряд правил:

1. Сдавать анализы стоит утром натощак (постараться поесть в последний раз минимум за 8 часов до процедуры).
2. Нельзя перед сдачей крови пить что-то, кроме воды.
3. За два дня нужно исключить жирные и жареные продукты, а также алкоголь.
4. Минимум за час лучше отказаться от сигарет.
5. Не рекомендуется сдавать анализы после массажа, УЗИ или рентгена.
6. За день до обследования пациент должен отказаться от медицинских препаратов, физической активности и эмоциональных нагрузок.
7. Полчаса перед обследованием стоит провести спокойно и расслаблено.

На скорость проведения обследования ПЦР влияет то, каким из типов вируса страдает пациент, каким методом проводится анализ крови. В зависимости от сложности результаты анализов больной может получить через несколько часов или несколько дней. Но обычно это не занимает больше 7 суток.

На стоимость ПЦР-исследования влияет статус клиники, куда пациент обратится, и от того, насколько сложным будет проведение анализа. Цена варьируется от 400 рублей до 11 тысяч.

Пациенту важно знать, что есть такое понятие, как отрицательно ложные анализы. Это может произойти, если кровь на анализ был сделан неправильно, с нарушением правил, или транспортировался ненадлежащим образом (например, попал в лабораторию больше, чем через два часа после забора). При такой ситуации больной рискует получить ложное представление о состоянии своего здоровья и потерять драгоценное время.

Поэтому крайне важно выбрать максимально подходящую клинику, которая печётся о своей репутации и не может позволить себе халатного отношения к пациентам. Перед тем как определиться, стоит почитать отзывы об учреждении и его персонале. Выбор лучше остановить на престижной и известной клинике – вероятность ошибки в этом случае будет мала.

Как с помощью ПЦР определяют вирусный гепатит С: виды анализов и расшифровка

ПЦР-диагностика гепатита С – это исследование биологических образцов с применением полимеразной цепной реакции. Способ заключается в многократном копировании фрагментов РНК вируса. Благодаря такой методике всего нескольких молекул возбудителя достаточно для того, чтобы тест отреагировал на присутствие вируса. Результат можно получить уже в первые 5-7 дней после контакта с зараженным человеком. ПЦР позволяет выявить факт инфицирования, а также приблизительную концентрацию HCV и его генотип.

Когда назначается анализ ПЦР

Самая очевидная причина для назначения ПЦР на гепатит С в крови – это наличие признаков заболеваний печени:

• хроническая усталость;

• боли в области печени;

• желтизна кожи и белков глаз;

• гипертрофия печени;

• тошнота.

Анализ на ПЦР целесообразно сделать в условиях повышенного риска заражения:

1. сексуальный контакт с предполагаемым носителем гепатита;
2. повышенная активность АЛТ и АСТ, выявленные по результатам биохимического анализа крови;
3. если результат ИФА на антитела к вирусу гепатита положительный.

Другие показания к сдаче крови:

• Врачи-гепатологи назначают ПЦР на гепатит С в профилактических целях перед операциями.
• Медработники и сотрудники детских садов и школ сдают анализ в ходе плановых проверок.
• Метод показан при проведении вакцинации против вируса гепатита В.
• Анализ проводится несколько раз в ходе терапии гепатита С, чтобы оценить ее эффективность.
• ПЦР нужен для исключения смешанного поражения печени, что иногда бывает при гепатите В.

Как подготовиться и сдавать кровь

В течение дня у человека меняется соотношение эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также активность некоторых гормонов. Прием пищи влияет на наличие жирных кислот в крови. Этот фактор мешает точности анализа. По этим причинам анализ ПЦР на гепатит С проводится утром натощак. В качестве исследуемого образца берется кровь из вены.

Перед сдачей анализа требуется подготовка:

1. за 2-3 дня – ограничить нагрузку на печень (исключить алкогольные напитки, не употреблять жирную и жареную пищу);
2. за сутки – исключить стресс, поднятие тяжестей, посещение спортзала и бассейна;
3. за 8 часов – прекратить употребление любой пищи, так как глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь, изменяют качество ферментной реакции;
4. с утра до момента сдачи крови – не курить.

На результат анализа может повлиять повышение концентрации адреналина в крови. Чтобы исключить эту погрешность, нужно прийти на 20 минут раньше, отдышаться и успокоиться.

На эффективность анализа крови могут влиять разные препараты – БАДы, средства с кофеином, этанолом, глюкозой, леводопой, пероральные контрацептивы, антибиотики. Даже если человек принимает обычные витамины, об этом нужно предупредить врача.

Расшифровка ПЦР на гепатит С

В настоящее время используются три метода ПЦР:

1. качественный (тест на наличие или отсутствие вируса);
2. количественный (тест на концентрацию вируса в крови);
3. с генотипированием (определяет принадлежность HVC к конкретному генотипу и субтипу).

Качественный анализ

Качественный анализ – это метод диагностики гепатита С, который позволяет подтвердить или опровергнуть присутствие вируса в крови. Выявляет наличие в определенной концентрации – в пределах 10-500 МЕ/мл. Выполняется в течение 1-4 дней и дает следующие результаты:

• «Не обнаружено» – вирус отсутствует либо его концентрация так мала, что реагент его не распознает.
• «Обнаружено» – вирус HCV присутствует, и его концентрация выше минимального порога чувствительности. Анализ выдает такой результат уже на 3-4 день после заражения.

Количественный анализ

Этот метод оценивает вирусную нагрузку, которая меняется в зависимости от стадии заболевания или этапа излечения. Метод не только показывает наличие флавивируса, но и его концентрацию в МЕ (международных единицах) на 1 мл крови. Это играет решающую роль при выборе тактики лечения гепатита С. Результаты количественной ПЦР-диагностики записываются следующим образом:

Количество вируса (МЕ/мл)	Расшифровка
Нет	Вирус отсутствует или количество HCV недостаточно для того, чтобы тест на него среагировал.
Менее 1,8х10^ 2	Концентрация вируса ниже линии границы.
Менее 8х10^ 5	Количество незначительное, соответствует началу заболевания. Прогноз благоприятный.
Более 8х10^ 5	Количество высокое, требуется лечение.
Более 2.4х10^ 7	Концентрация вируса выше линейного диапазона.

В результатах анализов очень часто можно увидеть степени, которые обозначаются как «^», например, 6*10^5 МЕ/МЛ, 10 в пятой степени это 100 тысяч, соответственно 6*10^5 МЕ/МЛ = 600 000 МЕ/МЛ.

Для упрощения подсчетов:

Просто подставляйте результат вашего анализы, который стоит перед знаком умножить, и вы получите результат. Учтите, что единицы измерения могут отличаться (копий/мл, ме/мл).

Если затрудняетесь или есть вопросы по другим переменным анализов, вы всегда можете написать нашему дежурному врачу-инфекционисту (чат в правом нижнем углу экрана). Он бесплатно расшифрует ваши анализы.

Количественный анализ ПЦР на гепатит С необходим для оптимального выбора препарата. С его помощью можно прогнозировать осложнения и эффективность терапии. Он позволяет оценить степень заразности носителя гепатита для окружающих: чем большее число вирусов насчитывается в крови, тем больше риск заражения.

Генотипирование

Сегодня известно, что у гепатита С имеется 11 генотипов и огромное количество субтипов. В разных странах есть свои приоритетные разновидности. В России в основном встречается 1 генотип (1b чаще, чем 1а), на втором месте по распространенности – 3 генотип (субтип 3а), на третьем – 2.

У каждого генотипа свои особенности. Зная их, можно спрогнозировать характер течения инфекции, риск перехода в хроническую форму и вероятность ответа на противовирусную терапию. Например, 3 генотип HCV провоцирует стеатоз, а 1 генотип требует лечения в течение 48 недель. По рекомендациям Минздрава генотипирование должно предшествовать противовирусной терапии.

Исходя из результатов, врач определяет противовирусный препарат, его дозировку, курс приема.

Преимущества и недостатки ПЦР

ПЦР-диагностика на вирусный гепатит С опережает иные методы по чувствительности, низкой вероятности ошибок и другим показателям:

• Позволяет выявить вирус на самых ранних стадиях, когда концентрация его в крови ничтожно мала. Для сравнения, иммунофлюоресцентный анализ (ИФА) реагирует только на иммуноглобулины, а они вырабатываются лишь через несколько недель в ответ на инфекцию. В то же время ПЦР реагирует на сам антиген и показывает присутствие вируса уже через 5 дней после заражения.

• Ложные результаты возникают гораздо реже, чем у других методов. Так, у ИФА возможны ложные результаты на гепатит при появлении перекрестных антител, но ПЦР реагирует непосредственно на патогены и такой погрешности не имеет.

• ПЦР – высокочувствительный метод. Анализ реагирует на присутствие РНК вируса гепатита уже 10-100 клеток в пробе и дает результат еще задолго до появления первых симптомов.

• В отличие от культуральных методов исследования, ПЦР проводится методом высокотехнологичной автоматизированной амплификации, что позволяет проводить тестирование в день забора.

Тест универсален и позволяет обнаружить несколько типов возбудителей гепатита в одной биологической пробе.

ПЦР-диагностика гепатита имеет и свои недостатки. Главный из них связан со способностью микроорганизмов к мутации. Вирусы гепатита приспосабливаются к условиям окружающей среды, и их генотип меняется. Когда это происходит, диагностическая система не может уловить гибрид. Второй недостаток ПЦР связан с возможностью получения ложноположительного и ложноотрицательного результата. Чтобы избежать ошибки, нужно соблюдать правила забора материала. Чаще всего погрешности возможны после уже проведенного лечения, поэтому принимать решение об отмене терапии может только лечащий врач.

Анализ ПЦР на гепатит С

Вирусный гепатит С относится к наиболее опасным и тяжело диагностируемым заболеваниям. Проблема в том, что нередко эта болезнь обнаруживается только на поздних стадиях ввиду того, что основной ее формой является хроническая, а ХГС проходит бессимптомно. Однако именно ранняя диагностика позволяет подобрать наиболее подходящее лечение, которое поможет навсегда забыть о вирусном воспалении печени.

Одним из самых универсальных способов определения ВГС является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Но что такое анализ ПЦР при гепатите С? В чем особенности этого тестирования? Чем анализ ПЦР на гепатит С качественный отличается от количественного? Как расшифровывается результат тестирования? Ответы на каждый из этих вопросов вы сможете найти в нашей статье.

Диагностика ВГС методом ПЦР

Полимеразная цепная реакция относится к наиболее распространенным и точным методам диагностики ВГС. Но что показывает ПЦР анализ на гепатит С? Результаты тестирования позволяют определить наличие флававируса в организме носителя, а также степень вирусной нагрузки в его организме.

Для анализа используется проба венозной крови пациента, взятой в день проведения исследования. Сдача ПЦР-теста на гепатит С рекомендуется следующим категориям лиц:

• Пациентам с обнаруженными иммуноглобулинами к антигенам возбудителя ВГС
• Женщинам в период беременности
• Работникам медицинских учреждений, постоянно контактирующим с инфицированными биологическими жидкостями
• Пациентам, в анамнезе которых числился ранее вылеченный вирусный гепатит
• Больным с явными симптомами поражения печени

Тест на гепатит С ПЦР может быть качественным или количественным. Оба метода активно используются при диагностике ВГС. Рассмотрим подробнее особенности качественного и количественного анализа ПЦР на гепатит С.

Качественно тестирование

Качественная реакция проводится в том случае, если предварительно установленный диагноз ВГС требует подтверждения. Результаты тестирования бывают положительными и отрицательными. Положительная реакция указывает на наличие возбудителя инфекции в организме обследуемого. В свою очередь, отрицательный результат указывает либо на отсутствие патогена, либо на его несущественную концентрацию.

Что такое ПЦР при гепатите (анализ качественного типа)? Это тестирование, помогающее окончательно определить диагноз. Стоимость его проведения в Москве, в зависимости от клиники, варьируется в пределах от 1800 до 3000 рублей.

Количественная реакция

Кровь на количественную полимеразную цепную реакцию сдается в том случае, если диагноз уже установлен. Анализ позволяет определить патогенную нагрузку в организме больного на текущий момент. Таким образом, лечащий врач получает информацию о том, какая площадь печени поражена флававирусом и может подобрать необходимую в конкретном случае терапевтическую схему.

Чем выше показатели патогена в крови обследуемого, тем более серьезную стадию заболевания придется лечить. Стоимость количественной полимеразной цепной реакции в московских клиниках колеблется в пределах от 1800 до 4000 рублей в зависимости от выбора медучреждения.

Подготовка к тесту на гепатит С ПЦР

Итак, ответ на вопрос «Что такое анализ ПЦР при гепатите С?» найден. Но как подготовиться к предстоящей диагностике? При подготовке к сдаче образца крови для теста на гепатит С ПЦР пациент должен:

• За несколько суток до явки в лабораторию полностью отказаться от фаст-фуда и другой тяжелой и жирной пищи
• В течение 24 часа до сдачи анализа ПЦР на гепатит С не употреблять спиртные напитки и воздерживаться от курения
• В течение 8 часов до диагностики не принимать пищу
• В целях собственной безопасности, перед введением в вену инъекционной иглы проследить за тем, чтобы медработник использовал исключительно стерильный одноразовый шприц

Крови для полимеразной цепной реакции берется совсем немного. Поэтому после процедуры пациенту реабилитация не требуется. Поэтому сразу же после процедуры больной отправляется домой. Диагностика проводится в утренние часы.

Расшифровка анализа ПЦР

Расшифровка ПЦР-теста на гепатит С проводится в условиях медицинской лаборатории. Погрешность в итоговых результатах зависит от компетентности медработников, а также от того, насколько обследуемый следовал правилам подготовки к тестированию.

В случае расшифровки анализа ПЦР на гепатит С качественного, важно учитывать порог чувствительности реагентов, колеблющийся в пределах 10-500 МЕ/мл. У качественной полимеразной цепной реакции может быть только 2 результата:

• Положительный. Диагноз вирусный гепатит С подтверждается за счет обнаружения флававируса в крови больного. Концентрация патогена в плазме крови достаточна для постановки диагноза. Если диагностика проводилась после лечения, такой результат указывает на неэффективность терапии.
• Отрицательный. Патоген отсутствует, либо концентрация его в крови до крайности мала. Подобный результат не всегда указывает на отсутсвие инфекции. Обследуемому рекомендуется сдать дополнительные тесты на чувствительность к реагентам.

Чтобы выяснить, что показывает ПЦР анализ на гепатит С при количественном тестировании, необходимо отталкиваться от серединного показателя, равного 8х10^5 МЕ/мл (800 000 МЕ/мл).

Если уровень патогенной нагрузки ниже или равен среднему, больному назначается медикаментозная терапия на основе препаратов прямого противовирусного действия. Если же показатель выше 800 000 единиц, лечащему врачу придется подумать о более серьезных мерах борьбы с ВГС. Возможно, больному понадобится трансплантация печени.

Определение вирусного гепатита С методом ПЦР проводится во многих медучреждениях столицы. При этом пройти тестирование можно как в стационарных, так и в амбулаторных условиях.

Анализ ПЦР на гепатит С

Гепатит С переходит из острой фазы в хроническую в 80% случаев. Репликация болезнетворных вирусов в функциональных клетках печени ведет к дисфункции органа. Это обусловлено тем, что паренхиматозная ткань заменяется соединительной. В результате анамнез больного дополняется кровотечениями в ЖКТ, интоксикацией организма, проблемами со свертываемостью крови. Поэтому чем раньше будут диагностированы патологические изменения, тем больше у пациента шансов на выздоровление. Анализ ПЦР на гепатит С считается наиболее точным методом исследования.

Этот диагностический метод разрешено проводить спустя несколько дней после заражения. Полимеразная цепная реакция позволяет достоверно определить генотип и концентрацию вируса в крови. Чтобы сделать анализ, у пациента берут биологический материал, в котором может присутствовать РНК возбудителя.

ПЦР на гепатит С осуществляют в три этапа:

• Качественный анализ – с его помощью определяют генетический материал возбудителя.
• Количественное исследование – таким образом выявляют вирусную нагрузку.
• Генотипирование – на этой стадии врач узнает разновидность заболевания.

Методику разработали около 30 лет назад. Ее применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний. ПЦР позволяет обнаружить уникальный генетический материал. Для этого используют праймеры. Так называют короткие нити РНК, которые присоединяют к началу гена.

Анализ ПЦР

В результате количество фрагментов болезнетворного вируса многократно увеличивается. Каждая фаза требует особого температурного режима и определенного промежутка времени. Молекула ДНК формируется в течение 3 минут. Амплификация включает в себя около 30 циклов. ПЦР делают в лаборатории посредством специального оборудования.

Показания к назначению

Сдача анализа ПЦР может быть обусловлена наличием клинических симптомов гепатита С. Процедура показана людям, которые:

• контактировали с инфицированным человеком;
• страдают от острых и хронических заболеваний печени;
• проходят лечение от патологических изменений в паренхиматозной ткани;
• входят в группу риска;
• являются донорами крови и ее компонентов.

ПЦР осуществляют не только при гепатите С. Анализ используют в медицине, биологии, криминалистике. Определение специфических показателей – этап, необходимый для подбора лекарственной схемы.

Преимущества анализа

В схему диагностического обследования включают иммунофлуоресцентный анализ и ПЦР. С помощью первого можно определить концентрацию иммуноглобулинов. Эти вещества вырабатываются защитным механизмом после проникновения болезнетворных вирусов в организм. В отличие от ПЦР ИФА не обладает эффективностью во время инкубационного периода. С помощью полимеразной цепной реакции гепатит С можно выявить в первые 7 дней после инфицирования.

Данное клиническое исследование обладает следующими характеристиками:

• Минимальная вероятность ложного результата.
• Высокая эффективность.
• Специфичность.
• Чувствительность.
• Универсальность.
• Автоматизация процесса.
• Безопасность.
• Скорость получения показателей.

Единственным минусом ПЦР является ее техническая сложность. Это связано с тем, что врачу необходимо подобрать правильный состав нуклеотидов, в функциях которых синтез ДНК. Из-за повышенной чувствительности метода возможно получение ложноположительного или ложноотрицательного результатов.

Чтобы добиться точности значимых показателей, биологический материал тщательно очищают от медикаментозных препаратов и белковых соединений. Для подтверждения результата требуется сравнение ранее проверенных образцов. К факторам, провоцирующим ошибку, причисляют:

Нарушение техники забора анализа

• Нарушение техники забора анализа.
• Изменения в последовательности фрагментов РНК.
• Совпадение синтезируемых нуклеотидов и генов болезнетворных вирусов.

Вероятность получения ложного результата при гепатите С присутствует из-за невозможности определения генетической основы заболевания. ПЦР-диагностика позволяет напрямую выявить возбудителя. С помощью амплификации ДНК происходит обнаружение болезнетворных микроорганизмов в продуктах питания, воде и почве.

Ограничения, касающиеся данного метода, не уменьшают его эффективности и популярности. Клиническое исследование проводят регулярно. Таким образом врач может оценить эффективность принятых лечебных мер. Необходимость в этом возникает из-за того, что вирус гепатита С способен мутировать. Отсутствие положительного эффекта означает адаптацию вируса к применяемым лекарственным средствам.

Подготовка к сдаче

Для того чтобы провести полимеразную цепную реакцию у больного, страдающего от гепатита С, берут венозную кровь. Обычно для изучения требуется две порции биологического материала. Посредством одной делается непосредственно ПЦР, а другую направляют на иммуноферментный анализ.

Кровь для анализа ПЦР берут из вены

Подготовка имеет большое значение. Пациент сдает кровь на ПЦР утром на голодный желудок. За несколько дней до процедуры придется отказаться от вредных продуктов питания, спиртных напитков, никотина и наркотиков. Больному следует избегать половых контактов, чрезмерной физической и эмоциональной нагрузки. Бассейн и спортзал оказываются под запретом. Подготавливаться придется в любом случае.

Существуют особые указания относительно медикаментозных препаратов. Это касается антибиотиков и антидепрессантов. Женщины, у которых начались менструации, должны отсрочить сдачу анализа на гепатит С. Кольпоскопия также является поводом для отказа от процедуры.

Перечисленные правила довольно просты. Благодаря им, можно добиться максимальной достоверности данного диагностического метода. Расшифровывать результаты должен специалист. Самостоятельно интерпретировать их у пациента вряд ли получится.

Процесс сдачи анализа

ПЦР-диагностику осуществляют следующим образом:

Кровь помещают в термостат

• Сначала забирают биологический материал. Кровь помещают в простерилизованные приспособления. Необходимый объем не превышает 1-1,5 мл. Держать кровь и ее компоненты следует не дольше 24 часов. Температура хранения не должна превышать 4 градусов по Цельсию.
• После начинают клиническое исследование. Подготовленную кровь помещают в термостат вместе с амплификационной смесью. Обычно требуется не более 25 мл специального состава. Амплификация проводится в автоматическом режиме на протяжении нескольких часов.
• Параллельно делают контрольные анализы. Для этого используют биологические материалы, взятые у здорового человека. Это поможет избежать ложных результатов.
• Расшифровка и регистрация показателей. Генетический материал обнаруживают с помощью бромистого этидия. Благодаря специфическому воздействию, фрагменты ДНК высвечиваются. Наличие (отсутствие) вируса выявляют ориентируясь на данные таблицы.

Расшифровка результатов

Определить значение полученных показателей может только инфекционист и гепатолог. Анализ ПЦР вводят диагностический комплекс вместе с биохимическим исследованием крови, УЗИ, ИФА и биопсией. Диагноз ставят на основании всех результатов. Порядок расшифровки анализов зависит от этапа диагностического обследования.

Ультразвуковая диагностика

На первой стадии ПЦР положительным результатом теста считается обнаружение фрагментов ДНК болезнетворного вируса. При проведении количественного анализа определяют уровень вирусной нагрузки. Она может быть низкой (менее 8*10^5 МЕ/мл), средней (от 8*10^5 МЕ/мл), высокой (больше 2,4*10^7 МЕ/мл). Нормой (отрицательным результатом) считается отсутствие специфических антител и частиц вирусной РНК. На этапе генотипирования об инфекционном заражении свидетельствует РНК определенного генотипа.

При получении положительного результата больному назначают эффективную терапевтическую схему. При этом обязательно учитывают информацию о наличии вируса в крови, степени его активности и генотипе. Цена процедуры зависит от методики тестирования, вида биологического материала. К общей стоимости могут быть добавлены затраты за забор крови или других жидкостей. Последнее обусловлено тем, что возбудителя часто обнаруживают в урине, каловых массах и сперме.

Качественный анализ на гепатит C: расшифровка

Причина развития вирусного гепатита C – инфицирование возбудителем, который относится к семейству Flaviviridae. Между заражением и началом выработки антител выявляется длительный временной промежуток, что не позволяет своевременно диагностировать заболевание посредством иммуноферментного исследования крови.

Анализ ПЦР на гепатит C, биохимия, ОАК, печеночные пробы проводятся при подозрении на заражение. Путем полимеразной цепной реакции можно выявить вирус в крови даже на первой неделе инфицирования, что выступает доминирующим преимуществом метода.

Количественный и качественный анализ на гепатит C и особенности исследования, как нужно подготавливаться, бывают ли ошибки, расшифровка – рассмотрим подробно.

Что такое метод полимеразной цепной реакции?

Полимеразная цепная реакция – методика молекулярного исследования для определения генетического материала вирусного агента с первых дней инфицирования. Анализ характеризуется высокой степенью достоверности, специфичностью, точностью. Благодаря нему не только выявляют отсутствие/наличие вируса, но и вирусную нагрузку (количественное значение), генотип.

Для исследования необходима кровь больного, в которой предположительно находится РНК вирусной инфекции. В лабораторных условиях в биологическую жидкость добавляют праймеры – это синтезированные искусственным образом фрагменты искомого гена малой длины. Плюс РНК-полимеразу – специализированный фермент, многократно увеличивающий концентрацию искомого материала.

Далее кровь с добавлением компонентов нагревают и охлаждают несколько раз в специальном приборе. После идет анализ полученных результатов, сопоставление с известными генами вирусного агента. На основе этого делают заключение о заболевании.

Разновидности исследования ПЦР

Анализ на гепатит C ПЦР проводится в лаборатории с добавлением нужных реагентов, имеет три разновидности с отличительными характеристиками:

1. Качественный ПЦР анализ на гепатит C является первым этапом исследования. Посредством него обнаруживают генетический материал возбудителя в сыворотке крови.
2. Количественное исследование позволяет оценить вирусную нагрузку – это содержание вирусного материала в 1 мл крови больного. Проводится перед началом курса лечения, а потом после 1-4-12 недели терапии. Когда курс продолжительный, то исследование необходимо провести после 24 недели терапии, чтобы оценить результативность.
3. Генотипирование. Заразное заболевание развивается стремительно, вирус имеет свойство мутировать. Поэтому необходимо выявить генотип вируса.

Ученые выявили 7 генотипов вируса. В РФ большую распространенность получили 1-2-3 виды.

Каждый из генотипов характеризуется устойчивостью к лечению.

Например, при 1-м типе результативность терапии около 60%, на фоне 2-3 вида показатель достигает 85%.

Чтобы подобрать нужные лекарства, продолжительность лечения, требуется выявить не только сам факт заражения, но и концентрацию вируса, его генотип.

Показания к проведению

Маркеры на гепатиты, ПЦР и ИФА, другие исследования имеют определенные медицинские показания:

• Когда в анамнезе больного ВИЧ-инфекция, СПИД.
• Контакт с зараженным человеком, поскольку вирусный гепатит отличается высокой степенью контагиозности.
• Симптоматика циррозного поражения печени – гепатомегалия, увеличение размеров селезенки, на животе проявился венозный рисунок и пр.
• Клиника функционального нарушения печени – периодическая/постоянная боль в области правого подреберья, пожелтение кожного покрова, тошнота.
• Высокие значения АСТ и АЛТ в биохимии крови.
• При беременности, когда плохие показатели печеночных проб.
• Перед началом противовирусного курса, чтобы определить вирусную нагрузку.
• Для контроля результативности проводимой терапии.
• После терапии, чтобы предупредить рецидив вирусной инфекции.

ПЦР проводится при подтвержденном диагнозе гепатита B, чтобы исключить смешанный вид поражения печени.

Подготовка к проведению исследования и забор материала

Как готовиться к анализу, расскажет доктор. Чтобы получить точный результат, пациенту рекомендуется подготовка. Она состоит в следующих рекомендациях:

1. Анализ нужно сдавать утром, натощак. Допускается перед забором крови пить только чистую, негазированную воду. Последний прием пищи – за 8 часов до забора.
2. Если не получается сдать анализ в утренние часы, это можно сделать вечером или в обед, главное – через 5-6 часов после приема пищи, не раньше.
3. За 48 часов до исследования отказаться от алкогольной продукции, кофеинсодержащих напитков, соков.
4. За 2 суток нужно соблюдать диету, исключив все вредные продукты. Однако некоторые врачи полагают, что жирная, жареная еда не сказывается на точности ПЦР исследования.

За 24 часа до медицинской манипуляции не принимать лекарства. Если это невозможно, сообщить лечащему врачу. Анализ не рекомендуется выполнять сразу же после УЗИ, КТ, массажа и др. физиотерапевтических процедур.

Забор крови происходит следующем образом:

• Посредством специального жгута, который затягивается на предплечье пациента, медик останавливает венозный кровоток. Вены становятся более заметными, что облегает процедуру введения иглы, последующего забора крови.
• Участок кожи перед введением стерильной иглы обрабатывают спиртосодержащей жидкостью.
• В вену вводят иглу, после к ней прикрепляют пробирку, в которую поступает кровь.
• После введения иглы жгут снимают. Набирают необходимое количество крови, извлекают иглу.
• К месту укола прикладывают ватку, смоченную в спирте.

Чтобы предупредить формирование синяка в месте введения иглы, необходимо ватный тампон достаточно сильно прижать к травмированной области, согнуть руку и держать в таком положении 3-4 минуты.

Если больной принимает лекарства, способствующие разжижению крови (Аспирин, Варфарин), могут быть определенные проблемы с остановкой кровотечения.

Преимущества ПЦР перед другими анализами

У метода полимеразной цепной реакции имеются определенные преимущества в сравнении с другими диагностическими методиками.

Плюсы исследования представлены в таблице:

Прямая диагностика возбудителя патологии	Другие исследования позволяют дать ответ – есть ли возбудитель в организме или нет. Но с помощью ПЦР методики можно конкретно установить вид вирусного агента.
Специфичность исследования	ПЦР определяет уникальный фрагмент ДНК, который соответствует только одной разновидности вирусного агента. Это позволяет свести к минимуму вероятность ошибки.
Высокая степень чувствительности	Можно выявить даже мизерную концентрацию вируса в крови.
Определение всех возбудителей	Во время исследования можно обнаружить всех патогенных агентов.
Скрыто протекающие инфекции	Кроме вирусного возбудителя можно выявить инфекции, которые имеют латентное течение, отличаются высокой антигенной активностью.

Когда пациент получает положительный результат, это будет означать, что в биологической жидкости был обнаружен генетический материал возбудителя гепатита. Отрицательный итог – следы вируса отсутствуют.

Расшифровка результатов

Расшифровывать результаты должен доктор на основании заключения, которое пациент получает в лаборатории. Анализировать данные необходимо в совокупности с показателями биохимии, ОАК, УЗИ.

Качественный

Качественное исследование будет показывать наличие либо отсутствие возбудителя вирусного заболевания в крови человека. Вариантов может быть два – отрицательный (норма) либо положительный результат.

В бланке иногда написано: обнаружено или не обнаружено.

Положительный результат – лаборант выявил в крови больного генетический материал вирусного агента, заражение подтверждено. Отрицательное заключение – заражения нет, фрагменты РНК вируса находятся ниже пределов чувствительности.

Количественный

Количественный анализ подразумевает несколько вариантов результатов. Для удобства ознакомления представим их в виде таблицы.

Результат	Расшифровка
Отрицательно	Это норма для здорового человека. Значит, в исследуемом биологическом материале нет РНК вирусного гепатита, либо содержание меньше порогов восприимчивости.
До 1,8*10^2 МЕ/мл	Говорит о том, что содержание РНК меньше диапазона количественного определения. Интерпретировать такой результат надо осторожно, потому что он считается спорным. Дополнительно проводятся другие исследования для последующего сопоставления. Также проводят повторно ПЦР-тест.
До 8*10^5 МЕ/мл	Низкая вирусная нагрузка. Как правило, такой результат значит, что проводимое лечение эффективно.
От 8*10^5 МЕ/мл	Высокая вирусная нагрузка. Незамедлительно требуется терапия (если не проводится), либо необходима коррекция медикаментозных назначений.
2,4*10^7 МЕ/мл	РНК больше верхнего максимума количественного определения. На фоне такого результата о вирусной нагрузке не судят. Требуется повторное исследование с разведением образца биологической жидкости.

Генотипирование

Результат – обнаружена рибонуклеиновая кислота конкретного генотипа. Дополнительно указывают генотип и подтип, лаборант кодирует заключение латинскими буквами и цифрами. Например, генотип 1a. Всего выделяют 7 генотипов, 67 подтипов.

Результат – обнаружена РНК вирусного гепатита C – это ДНК редкого генотипа, который нельзя отнести к распространенным вирусным агентам, поэтому требуется провести дополнительную диагностику.

Когда ПЦР отрицательно, а ИФА положительно

Расшифровывает заключение лаборанта гепатолог либо инфекционист. Всегда есть риск получения ложноотрицательного или ложноположительного результата. Иногда бывает, что ПЦР отрицательно, а ИФА положительно.

Это означает, что в данный момент вируса в крови больного нет, однако заболевание в острой форме им перенесено. Принято считать, что ИФА показывает антитела, которые продуцируются иммунной системой после вторжения в организм возбудителя.

ИФА в сравнении с ПЦР отличается малой надежностью и достоверностью, поэтому используется в качестве первичного скрининга. При диагностике вирусного гепатита без полимеразной цепной реакции не обойтись.

Стоимость исследования на гепатит С

Сдать анализы можно в больнице, где больной наблюдается, если там имеется своя лаборатория, либо обратиться в частный центр на платной основе.

В короткие сроки получить результат можно в лабораторных центрах как Гемотест, Инвитро, Хеликс.

Стоимость исследования в зависимости от лаборатории:

Название лабораторной службы	Ценовая политика
Хеликс	· Стоимость забора биологического материала – 170 рублей. · Качественное + количественное исследование методом ПЦР – 3990 рублей. · Выявление антител вирусной болезни – 1500 рублей (срок 2-3 дня). · Проверка активности вируса перед началом курса терапии – 4090 рублей.
Инвитро	· Количественное выявление РНК вируса гепатита C посредством ПЦР – 3140 рублей. · Забор биологического материала (венозной крови) – 199 рублей. · Оценка вирусной нагрузки с детекцией в режиме реального времени – 18 000 рублей. · Качественный ультрачувствительный тест – от 3000 рублей. · Проведение генотипирования – от 1250 рублей.
Гемотест	· Цена количественного исследования 2200 рублей. · Качественная диагностика от 700 рублей. · Определение РНК возбудителя – от 4000 рублей. · Забор крови из вены около 150 рублей.

Срок проведения исследования в среднем 2-3 дня. В некоторых лабораториях имеется услуга как срочный анализ, его стоимость в 1,5-2 раза выше. Также есть возможность вызвать медицинского специалиста домой, чтобы сдать кровь, а результаты получить по электронной почте либо лично при обращении в лабораторию.